活體成像
可見光活體成像技術(shù)主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用熒光報告基團(GFP、RFP,Cyt及dyes等)進行標記。利用一套非常靈敏的光學(xué)檢測儀器,讓研究人員能夠直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細胞活動和基因行為。通過這個系統(tǒng),可以觀測活體動物體內(nèi)的生長及轉(zhuǎn)移、感染性發(fā)展過程、特定基因的表達等生物學(xué)過程。
傳統(tǒng)的動物實驗方法需要在不同的時間點宰殺實驗動物以獲得數(shù)據(jù),得到多個時間點的實驗結(jié)果。相比之下,可見光體內(nèi)成像通過對同一組實驗對象在不同時間點進行記錄,跟蹤同一觀察目標(標記細胞及基因)的移動及變化,所得的數(shù)據(jù)更加真實可信。另外,這一技術(shù)對微小轉(zhuǎn)移灶的檢測靈敏度,不涉及放射性物質(zhì)和方法,非常。因其操作極其簡單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高等特點,在剛剛發(fā)展起來的幾年時間內(nèi),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等方面。光在哺乳動物組織內(nèi)傳播時會被散射和吸收,光子遇到細胞膜和細胞質(zhì)時會發(fā)生折射現(xiàn)象,而且不同類型的細胞和組織吸收光子的特性并不一樣。在偏紅光區(qū)域,大量的光可以穿過組織和皮膚而被檢測到。在相同的深度情況下,檢測到的發(fā)光強度和細胞的數(shù)量具有非常好的線性關(guān)系??梢姽怏w內(nèi)成像技術(shù)的基本原理在于光可以穿透實驗動物的組織并且可由儀器量化檢測到的光強度,同時反映出細胞的數(shù)量。